Иммуноферментный анализатор

ИФА (англ. Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) — лабораторный иммунологический метод выявления антигенов и антител, который основан на определении комплекса «антиген-антитело» благодаря введению в один из компонентов реакции ферментной метки с последующим её детектированием с помощью соответствующего субстрата, изменяющего свою окраску. Основой проведения любого варианта ИФА служит определение продуктов ферментативных реакций во время исследования тестируемых образцов по сравнению с отрицательными и положительными контролями. ИФА появился в середине 60-х годов и изначально был разработан как метод для идентификации антигена в гистологическом препарате, а также для визуализации линий преципитации в тесте иммунодиффузии и иммуноэлектрофорезе, а затем начал использоваться для количественного определения антигенов и антител в биологических жидкостях.

 

Современный мир демонстрирует стремительное развитие диагностических технологий, и за последние десятилетия был достигнут значительный прогресс, в частности в методе иммунохемилюминесцентного анализа (ИХЛА), который является современным продолжением ИФА. Этот метод относится к высокочувствительным микроанализам и сочетает хемилюминесцентную систему с иммунной реакцией. Хемилюминесцентные вещества содержат антитела или антигены, реагируют с исследуемыми образцами, а после добавления реагентов позволяют выявлять антигены или антитела количественно или качественно. ИХЛА активно развивается уже более 30 лет и является эффективной альтернативой радиоактивным методам и полуавтоматическому ИФА.

 

Преимущества ИХЛА

 

Хемилюминесцентная технология имеет ряд неоспоримых преимуществ, таких как:

 

• широкий динамический диапазон, больший, чем у иммунноферментных методов;
• высокая чувствительность и специфичность результатов, выраженных в количественной форме;
• высокий уровень автоматизации и сокращение времени, необходимого для проведения исследований;
• возможность проведения большого количества тестов на антитела (даже разных изотипов), направленных на множество показателей антигенных панелей;
• высокая чувствительность, что является ключом к улучшению производительности ИХЛА-анализа. Чувствительность некоторых анализаторов может достигать 10⁻¹⁶ моль/л;
• стабильность реагентов и низкая погрешность.

 

Иммуноферментные анализаторы делятся на несколько типов в зависимости от функциональных возможностей и уровня автоматизации:

 

1. Полуавтоматический иммуноферментный анализатор. Этот тип иммунологических анализаторов требует определённого вмешательства со стороны оператора для выполнения некоторых шагов в процессе анализа. Они менее дорогие и удобные для небольших лабораторий, где нагрузка на оборудование не очень высокая. Полуавтоматические анализаторы обычно применяются для обследования небольшого количества образцов.
2. Автоматический иммуноферментный анализатор. Этот иммунологический анализатор выполняет все этапы исследования без вмешательства оператора, что значительно снижает риск ошибок. Он способен проводить несколько тестов одновременно, имеет высокую чувствительность и обеспечивает максимальную точность результатов, что необходимо для больших лабораторий с большим потоком пациентов. Автоматический иммунологический анализатор используется для диагностики широкого спектра заболеваний, включая аллергические и онкологические. Однако проведение анализов на автоматическом ИФА-анализаторе занимает много времени, минимальное время составляет около 4 часов.
3. Иммунохемилюминесцентный анализатор. Метод ИХЛА имеет значительные преимущества перед ИФА, в частности по скорости анализа: результаты можно получить в тот же день, тогда как автоматизированный ИФА требует больше времени. Кроме того, ИХЛА экономически выгоднее, поскольку калибровка выполняется раз в четыре недели, в отличие от ИФА, где калибровочную кривую нужно создавать ежедневно, особенно при малом и среднем потоке тестов. Автоматизация ИФА используется реже, чем ручной метод, и, к тому же, существенно повышает стоимость анализов, что делает ИХЛА ещё более привлекательным выбором для лабораторий. Реагенты для ИХЛА разрабатываются специально для конкретного анализатора и тестируются производителем в сочетании с ним, что гарантирует достижение заявленных характеристик. Заводские настройки таких приборов минимизируют потребность в частой калибровке, обеспечивая длительную и надёжную работу. Напротив, метод ИФА использует анализаторы открытого типа, где реагенты изначально тестируются для «ручной» работы, а протоколы подстраиваются под анализатор. Это требует более частой настройки из-за возможности «расстройки» параметров, что снижает эффективность и надёжность работы прибора.

 

Хемилюминесцентный метод обладает высокой прикладной ценностью для раннего выявления заболеваний, исследования их развития, а также проведения качественной оценки процесса после лечения и мониторинга возможных рецидивов. Всё это делает данную технологию незаменимой в работе современной клинической лаборатории.

 

Применение иммуноферментного анализатора в медицине

 

ИХЛА широко применяется в медицине для диагностики различных заболеваний и мониторинга их течения. Основные сферы использования:

 

• Инфекционные заболевания. Иммуноферментный анализатор используется для выявления вирусных и бактериальных инфекций, например, гепатитов, ВИЧ, респираторных и урогенитальных инфекций.
• Аллергология. Метод ИХЛА в аллергологии обеспечивает точное определение специфических IgE к отдельным аллергенам с высокой чувствительностью, что позволяет своевременно начать лечение благодаря быстрому получению результатов в течение одного дня.
• Онкология. С помощью ИФА определяют онкомаркеры, что позволяет проводить скрининг на ранних стадиях онкологических заболеваний и повысить эффективность лечения.
• Репродуктивная эндокринология и гинекология. ИФА позволяет определять уровень гормонов, что важно для мониторинга репродуктивного здоровья, выявления отклонений в уровне гормонов, а также при лечении бесплодия.
• Общая диагностика. ИФА также применяется для определения уровня различных параметров и маркеров, отражающих состояние иммунной системы, в частности для тестирования на наличие инфекционных агентов.

 

Сегодня иммуноферментные анализаторы являются важной составляющей медицинских лабораторий. Благодаря высокой точности и чувствительности, а также возможности автоматизировать процесс проведения анализа, ИФА стали незаменимым инструментом современной медицины. Купить иммунологический анализатор можно в интернет-магазине Эмпирика по доступным ценам с доставкой по Украине.